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      公司產品
      
                       
                    
      
                
      
                
            
      
            
        
      
        


          
        
      
            
      
                
      
                   
				   
				       
      
                        
      
                          
                            
      miRNA抑制劑
      
                            
      有效的抑制內源性成熟miRNA功能,21-23 nt 2’-甲氧修飾的RNA寡核酸設計
      
                           
                               
 


      產品描述
      


       
      
	產品特點： 

      

      
	1、有效的抑制內源性成熟miRNA功能 

      
2、21-23 nt 2’-甲氧修飾的RNA寡核酸設計
      
3、較低的濃度就能高效長久的抑制miRNA活性
      
4、GMR-miRTM microRNA Inhibitors 是單鏈的化學修飾的增強型寡核苷酸對sanger miRNA 數據庫:http://microrna.sanger.ac.uk中所有人、小鼠以及大鼠miRNA有效
      

      

      
	GMR-miRTM microRNA inhibitors的應用： 

      

      
	1、利用GMR-miRTM microRNA inhibitors抑制活體microRNA活性來研究Loss-of-function效應 

      
2、篩選調控基因表達和影響細胞發育過程的miRNAs
      
3、深入研究miRNA在一些生物過程中的作用，如細胞的發育、增殖、分化和凋亡
      

      
	4、發現和驗證內源性的miRNA target

      

      
	
      
		
			
      
				
					
      
						目錄號 
					
      
				      		
				
					
      
						產品名稱 
					
      
				      		
				
					
      
						規格（OD） 
					
      
				      		
				
					
      
						純化方式 
					
      
				      		
				
					
      
						價格
					
      
				      		
			
      
			
      
				
					
      
						B03001
					
      
				      		
				
					
      
						GMR-miRTM?microRNA inhibitors
					
      
				      		
				
					
      
						2
					
      
				      		
				
					
      
						HPLC
					
      
				      		
				
					
      
						￥350
					
      
				      		
			
      
		      
	
      

      

		
						   
		   


      功能介紹與實驗實例
      


       
      
	miR-21 inhibitors 實驗設計 ，常規Anti-miR-21設計（2’OMe）: 

      

      
As-miR-21: 5’-UCAACAUCAGUCUGAUAAGCUA-3’
      

      
NC：5’-UUGUACUACACAAAAGUACUG-3’
      

      
NC-FAM：5’- FAM-UUGUACUACACAAAAGUACUG-3’
      

      
全鏈2’-O-Me修飾。?
      

      
二、實驗方案?
      

      
1. 細胞培養?
      

      
293T，A549
      
7* 10cm dish細胞?
      
Lipofectamin 2000：250ul
      
Ezol：50ml
      
Hairpin-it miR-21 qPCR kit (300runs)：1個?
      

      
2. 轉染效率評價?
      

      
A549細胞接種于24孔板，轉染Inhibitor-NC FAM優化轉染試劑與inhibitor的濃度配比，轉染4-6h，熒光顯微鏡觀察轉染效率，確定最佳轉染條件：
      

      
1. Inhibitor：25nM Lipo：1ul?
      
2. Inhibitor：25nM Lipo：2ul
      
3. Inhibitor：50nM Lipo：1ul?
      
4. Inhibitor：50nM Lipo：2ul
      
5. Inhibitor：100nM Lipo：1ul?
      
6. Inhibitor：100nM Lipo：2ul
      

      

      

      

      
b. miRNA inhibitor轉染
      
inhibitor 3個濃度梯度：25nM，50nM，100nM；NC選擇100nM轉染。
      

      

      

      
	
      

      











      使用方法
      


       
      
  
      
    MicroRNA Inhibitor介紹
  
      
  
      
    MicroRNA Inhibitor是用來抑制內源性的MicroRNA的功能。特異的MicroRNA inhibitor能夠被導入到表達特異的microRNA的細胞內，抑制MicroRNA的作用，也可以用來抑制表達特異的內源性的miRNA的報告載體的表達。
  
      
  
      
    抑制特異性的內源性的miRNA
  
      
  
      
    為了分析miRNA對生物過程和內源性的靶的作用效果，miRNA inhibitor 能夠被轉染入細胞評價此效應能否被逆轉。
  
      
  
      
    轉染程序
  
      
  
      
    轉染效率對不同的細胞株和不同的轉染試劑是不同的。我們建議miRNA inhibitor 的終濃度為15-100nM
  
      
  
      
    最優化的轉染濃度最終還是需要通過試驗來確定。我們發現典型的試驗中最佳的濃度范圍是15-100nM，但是優化的濃度范圍我們設定在1-100nM之間。
  
      

      

      

      
  
    
      
      
       
      
      
      		
      96孔板
      24孔板
      12孔板
    
      
    
      
      
       轉染試劑A 
      		
      
       0.3-1.0 ul 
      		
      
       1-3 ul 
      		
      
       2-4 ul 
      		
    
      
    
      
      
       MicroRNA inhibitor B 
      		
      
       3 pmol 
      		
      
       15 pmol 
      		
      
       30 pmol 
      		
    
      
    
      
      
       Cell density C 
      		
      
       6000 cells/well 
      		
      
       40,000 cells/well 
      		
      
       80,000 cells/well 
      		
    
      
    
      
      
       Final volume per well 
      		
      
       0.1 ml 
      		
      
       0.5 ml 
      		
      
       1.0 ml 
      		
    
      
    
      
      
       A：轉染試劑的推薦量，根據您訂購的試劑不同應做適當的調整
      
        B：所顯示的添加量是miRNA inhibitor終濃度為30nM的量。由于最大miRNA inhibitor活性的量在不同的細胞類型是有差異的，所以推薦您自行優化。
      
        C：對細胞密度只是推薦值，不同的細胞株有一定的變化，主要看細胞的大小和生長的狀況，一般來說我們推薦細胞融合度在30-70％為佳。 
      
        
       
      
        
      		
    
      
    
      
      轉染優化
      ?
    
      
    
      
      
      ?
      
        
       優化轉染效率是使得miRNA inhibitor 活性最大化的的最關鍵的一個因素之一，對每種轉染試劑而言，首先要確定一款最合適的轉染試劑，主要看從以下幾點著手處理： 
      
        
          
       1、轉染試劑的量 
      
          
       2、MicroRNA inhibitor的量 
      
          
       3、轉染時的細胞密度 
      
          
       4、轉染時候的操作順序 
      
          
       5、細胞與轉染試劑/siRNA復合物的接觸時間 
      
           		
    
      
        

      



      產品說明書
      


        
      





		


      相關文獻
      


       
      
	1.Chen S, Sun YY, Zhang ZX, Li YH, Xu ZM, Fu WN.
Transcriptional suppression of microRNA-27a contributes to laryngeal cancer
differentiation via GSK-3β-involved Wnt/β-catenin pathway. Oncotarget.
2017 Feb 28; 8(9): 14708-18.??

      

      
	2.Kong LY, Xue M, Zhang QC, Su CF. In vivo and in
vitro effects of microRNA-27a on proliferation, migration and invasion of
breast cancer cells through targeting of SFRP1 gene via Wnt/β-catenin signaling
pathway. Oncotarget. 2017 Feb; 8(9): 15507-19.

      

      
	3.Kong X, Liu F, Gao J. MiR-155 promotes
epithelial-mesenchymal transition in hepatocellular carcinoma cells through the
activation of PI3K/SGK3/β-catenin signaling pathways. Oncotarget. 2016 Oct 4;
7(40): 66051-60.?

      

      
	4.Li X, Liang Q, Zhang W, Li Y, Ye J, Zhao F, Chen
X, Wang S. Bio-inspired bioactive glasses for efficient microRNA and drug
delivery. Journal of Materials Chemistry B. 2017 Jul.

      

      
	5.Ren Y, Chen Y, Liang X, Lu Y, Pan W, Yang M.
MiRNA-638 promotes autophagy and malignant phenotypes of cancer cells via
directly suppressing DACT3. Cancer Letters. 2017 Apr 1; 390: 126-36.?

      

      
	6.Sun Y, Xu J, Xu L, Zhang J, Chan K, Pan X, Li G.
MiR-503 Promotes Bone Formation in Distraction Osteogenesis through Suppressing
Smurf1 Expression. Scientific Reports. 2017 Mar; 7: 409.

      

      
	7.Xue X, Qiu Y, Yang HL. Immunoregulatory Role of
MicroRNA-21 in Macrophages in Response to Bacillus Calmette-Guerin Infection
Involves Modulation of the TLR4/MyD88 Signaling Pathway. Cellular Physiology and
Biochemistry. 2017 May 12; 42(1): 91-102.

      

      
	8.Yu F, Guo Y, Chen B, Shi L, Dong P, Zhou M,
Zheng J. LincRNA-p21 Inhibits the Wnt/β-Catenin Pathway in Activated Hepatic
Stellate Cells via Sponging MicroRNA-17-5p. Cellular Physiology and
Biochemistry. 2017 Jun; 41(5): 1970-80.

      

      
	9.Zhou Z, Wan J, Hou X, Geng J, Li X, Bai X.
MicroRNA-27a promotes podocyte injury via PPARγ-mediated β-catenin activation
in diabetic nephropathy. Cell death & disease. 2017 Mar; 8(3): e2658.

      

      
	10.Zeng Z, Wang K, Li Y, Xia N, Nie S, Lv B, Zhang
M, Tu X, Li Q, Tang T, Cheng X. Down-regulation of microRNA-451a facilitates
the activation and proliferation of CD4+ T cells by targeting Myc in patients
with dilated cardiomyopathy. Journal of Biological Chemistry. 2017 Apr 7;
292(14): 6004-13.

      



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1. RNA干擾研究工具
      
2. MicroRNA研究工具 
      
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	上海公司的聯絡方式如下： 

      

      
	公司名稱：上海吉瑪制藥技術有限公司 

      

      
	地址：上海市浦東新區哈雷路1011號9幢602室 

      

      
	郵編：201203 

      

      
	電話：021-51320195，021-51370738，021-51370739，4006900195 

      

      
	E-mail：order@genepharma.com(產品訂購）support@genepharma.com(技術支持） 

      

      
	上海、南京、浙江、安徽、云南、山東、福建、重慶、四川、貴州、西藏、陜西、甘肅、寧夏、新疆、青海、河南、山西、香港、澳門、臺灣以及其他境外客戶訂貨地區請聯系上海公司 

      

      
	
      

      

      
	蘇州公司的聯絡方式如下： 

      

      
	公司名稱：蘇州吉瑪基因股份有限公司 

      

      
	地址：蘇州工業園區東平街199號 

      

      
	郵編：215123 

      

      
	電話：0512-86668828 

      

      
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	北京、河北、內蒙古、天津、武漢、江西、黑龍江、吉林、遼寧、湖北、湖南、廣東、江蘇（除南京）、廣西、海南訂貨地區請聯系蘇州公司

      

      
	
      

      



      



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