+400-6900-195
公司產品
腺病毒產品
可以提供干擾或過表達腺病毒構建及包裝產品與驗證服務。
產品簡介
腺病毒（Adenovirus,Ad）是一種線性雙鏈DNA病毒。腺病毒載體作為極具潛力的哺乳動物基因轉移載體而得到廣泛應用。吉瑪可以提供過表達腺病毒載體構建及包裝的產品與服務
優勢
1、可感染的細胞種類多，宿主范圍廣，幾乎可以感染所有類型的細胞。
2、感染效率高，重組腺病毒我被廣泛應用于使用脂質體轉染效率較低細胞的基因轉導和蛋白表達。
3、包裝外源基因的片段大。
4、腺病毒載體構建及包裝容易操作，易于制備出滴度高的大量病毒。
5、當腺病毒感染細胞后，病毒基因組存在于細胞染色體外，不整合到細胞染色體中，避免了因整合引起的基因突變及激活致癌基因，生物安全性高。
產品描述
腺病毒對照吉瑪提供無關序列陰性對照腺病毒，陰性對照價格實惠!
| 病毒類型 | 滴度 | 200ul | 400ul | 600ul | 1ml |
| 過表達腺病毒NC | 10^8pfu/ml | ￥1000 | ￥1500 | ￥2000 | ￥3000 |
| 過表達腺病毒NC | 10^9pfu/ml | ￥1500 | ￥2300 | ￥3100 | ￥4000 |
shRNA腺病毒產品
吉瑪公司傾情推出腺病毒系列產品，為廣大科研工作者在新的一年里提供有力的干擾手段，解決轉染效率低，抑制效率不高的難題。我們的腺病毒包裝快速（20個工作日起），性價比高，定制1ml滴度為10的9次方pfu/ml的病毒液只需要3880元/ml腺病毒超值套餐的分類
腺病毒干擾超值A套餐，價格9800元(設計4個干擾靶點，每個包裝10^8 ?pfu/ml病毒1ml,對照贈送1ml）
腺病毒干擾超值B套餐，價格13000元(設計4個干擾靶點，每個包裝10^9 pfu/ml病毒1ml,對照贈送1ml）
腺病毒干擾經濟C套餐，價格7880元(設計3個干擾靶點，每個包裝10^8 pfu/ml病毒1ml,對照贈送0.6ml）
腺病毒干擾經濟D套餐，價格10880元(設計3個干擾靶點，每個包裝10^9 pfu/ml病毒1ml,對照贈送0.6ml）
腺病毒干擾經濟E 套餐，價格13880元(設計3個干擾靶點，每個包裝10^10 pfu/ml病毒1ml,對照贈送0.6ml）
腺病毒干擾經濟F套餐，價格16880元(設計3個干擾靶點，每個包裝10^11 pfu/ml病毒1ml,對照贈送0.6ml）
備注：套餐內3-4個靶點保證1個有效（mRNA水平70%左右干擾效果），如無效，可以選擇退款或者作預付款或者免費重新設計靶點再包裝1次。
需要干冰件運輸，除江浙滬外所有地區，需要加收￥300 運費。
吉瑪shRNA合成腺病毒載體類型：
? ?
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
? ?
? ? ? ? ? ? ? ? ??
過表達腺病毒
吉瑪過表達腺病毒收費標準：
| 產品 | 規格 | 報價（元）? | 備注 |
| 過表達腺病毒 | 10^7-10^8pfu/ml | 2*堿基數+3880 | 插入序列及長度會影響過表達病毒滴度 |
| 過表達腺病毒 | 10^8-10^9pfu/ml | 2*堿基數+4880 | |
| 過表達腺病毒 | 10^9-10^10pfu/ml | 2*堿基數+5880 | |
| 過表達腺病毒 | 10^10-10^11pfu/ml | 2*堿基數+6880 |
對于高GC，重復序列或較長序列等特殊情況，費用需要特殊評估。
需要干冰件運輸，除江浙滬外所有地區，需要加收￥300 運費。
吉瑪全基因合成腺病毒過表達載體類型：
? ? ?
?
?? ??
靶細胞感染預實驗
1) 試驗前一天分別接種 3~5×10 3 個目的細胞于 96 孔培養板每孔中，所加培養基體積為 100uL。不同種類的細胞生長速度有所差異，為保證有較好的實驗結果，進行病毒感染時細胞的融合度為 60~80%。因為腺病毒表達需要一定的時間，故在進行感染實驗時細胞接種不宜過密。
2) 干擾預試驗共分為二組，每組均有不同梯度的 MOI 值（Multiply of Infection） 。第一組為正常情況下感染，也就是在完全培養基中直接加入病毒。第二組為感染時添加 3~8 ug/mL 的 Polybrene。Polybrene 在大部分細胞中可以有效的提高感染效率。
3) 感染前為細胞換液，吸去細胞上清，按不同的分組情況加入所需的培養基 90uL，每組三個復孔。
4) 準備 3 個無菌的 EP 管，吸取 10ul 的 1×10^8 pfu/ml 的病毒（預先從-80℃取出，迅速融化，4℃低溫操作）加入到第一個管子中，輕柔混勻，勿產生泡沫。同樣從第一管吸取 10ul 的病毒到第二管中，混勻。再從第二管中吸取 10ul 的病毒到第三管中，混勻。這樣就得到了四個不同梯度的病毒：原液，10 倍稀釋，100倍稀釋，1000 倍稀釋。
5) 把細胞放回培養箱孵育。
6) 8~12 小時以后，請觀察細胞狀態。如果細胞狀態與未感染組無明顯差異，表明腺病毒對細胞沒有明顯毒性作用，請不要換液，繼續培養，直至 24 小時后更換為新鮮培養基。
7) 感染 48~72 小時后，觀察熒光表達情況。對于生長遲緩代謝慢的細胞，可以適當延長觀察時間，中途可以換液保持細胞的良好狀態。
8) 以上的操作是針對貼壁細胞設計的。懸浮細胞的區別主要在細胞的分盤上，它不需要提前一天分盤。操作時直接將細胞離心后懸浮在不同的培養基中，計數分盤后，即可加入病毒。
9)通過首次實驗和重復實驗，確認目的細胞的感染方法和感染參數。
正式試驗
1）通過預實驗可以幫助確定使用重組 Adenovirus 顆粒感染目的細胞的優化條件，如細胞接種密度，是否需要添加 Polybrene，合適的 MOI 值等參數。正式實驗前，調整并保持細胞的良好狀態是非常重要的。有些對 Polybrene 敏感，建議不能添加Polybrene 去增強感染效率。
2）Adenovirus 表達時間較長，但在一般代謝較旺盛的細胞（如 293T，BHK21 等）上， 病毒感染 24hrs 后可以觀察到 GFP 熒光； 代謝比較緩慢的細胞 （如原代培養細胞，神經干細胞，胚胎干細胞等）GFP 蛋白表達時間較長，感染后 72-96hrs 甚至更長時間才可以觀察到 GFP 熒光。感染后的細胞可以連續培養一周，通過觀察 GFP 的表達時間和表達強度來確定 Adenovirus 對目的細胞的感染情況。感染后期請根據細胞生長的情況對細胞進行及時換液和傳代，以保證細胞良好的生長狀態。??
運輸和儲存
1)對于長距離運輸，應先將腺病毒載體保存在-80℃，再采用全程干冰運輸，以防滴度下降。
2)腺病毒載體在-80℃保存 6 個月，滴度不會明顯下降。建議保存 6~12 個月以上的樣品，進行實驗前重新測一次滴度。應盡量避免反復凍融（小于 3 次） 。
3)使用前從-80℃取出病毒，室溫迅速融化，操作過程應置于冰盒上進行。用不完的病毒可以暫時放在-20℃冰箱中，但最好盡快用完。
病毒滴度復核（有限稀釋法測定）
1) 滴度檢測前一天，對 293T 細胞傳代，96 孔板每個孔加入約 0.5~10×10 3 個細胞，體積 100ul；
2) 第二天，準備 7~10 個無菌 EP 管，在每個管中加入 90ul 的新鮮完全培養基（高糖 DMEM+10%FBS）；
3) 取待測定的病毒原液 10ul 加入到第一個管中，輕輕混勻后，取 10ul 加入到第二個管中，然后依次操作直到最后一管；
4) 選取所需的細胞孔，吸棄 90ul 培養液，然后將稀釋好的病毒液，從低濃度到高濃度依次加入，放入 37℃ 5% CO 2 培養箱中培養；
5) 24 小時后， 每孔換入 100ul 新鮮培養液， 小心操作， 不要吹起細胞； 放入 37℃ 5%CO 2 培養箱中繼續培養。
6) 1~3 天后，觀察熒光表達情況，正常情況下，熒光細胞數隨稀釋倍數增加而相應減少，計數最后二個含有熒光細胞的孔中的熒光細胞個數，將得到的數值除以各自相應的稀釋倍數，即可計算出病毒原液的滴度值（通常以倒數第二個孔中的讀數值更為準確）顯微鏡品質、相關實驗試劑及實驗人員操作技能，因此不同實驗室測得滴度數值會有所差異（2~10 倍） ，但基本不會影響正常實驗流程；
7) 病毒滴度(BT = PFU/ml, transducing units)計算方法：
按 10 4 /孔 293 細胞接種腺病毒后 36～48h, 觀察到在 10 -2 、 10 -3 稀釋度的樣本中 293 細胞出現完全 CPE 現象: 90%細胞變圓, 10%細胞浮起。 按上述公式計算擴增所得腺病毒
的滴度約為 5×10^8 PFU/mll.
Guan S, Zhou J. Frizzled? 7 mediates TGF-β-induced pulmonary fibrosis by transmitting non-canonical Wnt signaling. Experimental Cell Research. 2017 Jul 20.?in enhanced killing on EGFRvIII-positive cells. Oncotarget. 2017 Apr 18; 8(16): 26256-68.
Xu Z, Han K, Chen J, Wang C, Dong Y, Yu M, Bai R, Huang C, Hou L. VEGF is neuroprotective against ischemic brain injury by inhibiting scavenger receptor A expression on microglia. Journal of Neurochemistry. 2017 Jun.
Yu F, Guo Y, Chen B, Shi L, Dong P, Zhou M, Zheng J. LincRNA-p21 Inhibits the Wnt/β-Catenin Pathway in Activated Hepatic Stellate Cells via Sponging MicroRNA-17-5p. Cellular Physiology and Biochemistry. 2017 Jun; 41(5): 1970-80.
Zheng DZ, Bu YM, Wang L, Liu J. MicroRNA-130b Promotes Wear Particle-induced Osteolysis via Downregulating Frizzled-related Protein (FRZB). Current neurovascular research. 2017 Feb; 14(1): 32-8.?ry. 2017 Jun; 41(5): 1970-80.
目錄分類 本商品目錄中的產品介紹按以下內容分類：
1. RNA干擾研究工具
2. MicroRNA研究工具?
產品價格 本產品目錄中標示的價格均為國內統一零售參考價，全部為人民幣價格。如果大量定購時，在標準價格的基礎上有不同程度的優惠。?
質量保證 凡吉瑪公司的產品均有嚴格的質量保證。如果我們發現確實存在質量問題時，保證更換產品。如果在到貨后一個月之內用戶無提出異議，我們將視本產品為優良產品而不再受理投訴事宜。提出產品異議（或投訴）時，切莫在產品使用完（或快使用完）后提出，以備本公司回收產品，確認產品質量。由于訂錯產品而產生的退貨情況，原則上由客戶承擔相關費用。發生投訴事宜時，公司只保證在產品價格額度范圍之內酌情賠償，恕不受理超過制品價格額度以上之部分。退款時需退還原始發票。
交通運輸 吉瑪公司承諾以最快捷的運送方式保證用戶及時收到訂購的產品。由總部直接發貨，如一次訂貨達1，000元可免運費；不足1，000元的訂貨，我們根據具體情況酌情收費(上海地區免運費）。我們公司產品一般采用快遞方式發貨。另外對應需要特殊運輸的產品（例如病毒產品等冷鏈運輸產品）需要收取300元的特殊運輸費用。
下單前請務必核對訂購表客戶信息和訂購內容無誤，訂單一經確認，當天即啟動生產。 超過當日17：00后不能修改或者取消，如果需要取消訂單，由此產生的費用，將由客戶承擔。
【取消訂單費用規則】
（1）當日17：00前，免費修改或取消。
（2）當日17：00到次日17：00前，按該項產品金額的50%收取。
（3）次日17：00后，按該項產品金額的100%收取。
更多產品訂購